第５０卷２０１ １年第５期 ９月 中山大学学报（自然科学版） ＡＣＴＡ ＳＣＩＥＮＴＩＡＲＵＭ ＮＡＴＵＲＡＬＩＵＭ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＡＴＩＳ ＳＵＮＹＡＴＳＥＮＩ Ｖｏｌ Ｊ５０ Ｎｏ．５ Ｓｅｐ． ２０１１ 水稻胰蛋白酶抑制剂对褐飞虱产卵刺激的响应 解晓军，高媛媛，戚舒，周 强 （中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室∥昆虫学研究所，广东广州５１０２７５） 摘 要：昆虫产卵过程对寄主植物的直接刺激包括产卵器的机械损伤和卵表面物质带来影响，这些刺激是启动 植物诱导抗虫性的重要途径。通过对褐飞虱产卵处理后水稻植株内胰蛋白酶抑制剂（ＢＢＰＩ）合成酶基因的表达 量及物质含量的测定，对比褐飞虱取食和机械损伤处理，发现褐飞虱产卵能够诱导水稻ＢＢＰＩ合成酶基因的表达 和ＢＢＰＩ物质的生成。处理后６ ｈ，１２ ｈ，水稻ＢＢＰＩ表达量显著高于取食和机械损伤处理；产卵诱导的ＢＢＰＩ物质 含量显著高于正常水稻。褐飞虱产卯诱导水稻启动ＢＢＰＩ表达和物质合成表明，与取食危害类似，水稻同样会对 褐飞虱产卵刺激产生响应，启动相应的植物防御体系，进而达到阻滞褐飞虱危害的目的。 关键词：水稻；褐飞虱；产卵；胰蛋白酶抑制剂 中图分类号：Ｑ９６６ 文献标志码：Ａ 文章编号：０５２９—６５７９（２０１１）０５—０１０４—０６ Ｒｉｃｅ Ｂｏｗｍａｎ Ｂｉｒｋ Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ Ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｉｌａｐａｒｖａｔａ ｌｕｇｅｎｓ（Ｓｔｌｉ１） ＸＩＥ Ｘｉａｏｊｕｎ，ＧＡＯ Ｙｕａｎｙｕａｎ，Ｑ１ Ｓｈｕ，ＺＨＯＵ Ｑｉａｎｇ （Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｅｎｔｏｍｏｌｏｇｙ＆Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌ， Ｓｕｎ Ｙａｔ—ｓｅｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５ １ ０２７５，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｈｙｓｉｃａｌ ｄａｍａｇｅ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｏｖｉｐｏｉｓｔｏｒ ａｎｄ ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ａｔｔａｃｈｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｉｎｓｅｃｔｓ’ｅｇｇｓ ａｒｅ ｂｏｔｈ ｉｎｃｌｕｄｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉｒｅｃｔ ｓｔｉｍｕｌｉｓ ｏｆ ｉｎｓｅｃｔｓ’ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｈｏｓｔ ｐｌａｎｔｓ ｗｈｉｃｈ ａｒｅ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｉｍｐｏｒ— ｔａｎｔ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ａ ｗｉｄｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｄｅｆｅｓｉｖｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｐｌａｎｔｓ．Ｔｈｉｓ ａｒｔｉｃｌｅ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｃｏｍｐａｒｅ ｗｉｔｈ ｆｅｅｄｉｎｇ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ，ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｒｏｗｎ Ｐｌａｎｔｈｏｐｐｅｒ（ＢＰＨ，Ｎｉｌａｐａｒｖａｔａ ｌｕｇｅｎｓ（ＳｔＭ）） ｃａｎ ｉｎｄｕｃｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＢＢＰＩ（Ｂｏｗｍａｎ Ｂｉｒｋ Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ ｇｅｎｅ ａｎｄ ｃａｕｓｅ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＢＢＰＩ．Ｂｏｔｈ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＢＢＰ１ ｗｉｔｈ ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｆｔｅｒ ６ ｈ ａｎｄ １ ２ ｈ ａｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｆｅｅｄｉｎｇ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｄｉｓｃｒｉｂｅｄ ａｂｏｖｅ ｉｎｄｉｃａｔｅ ｔｈａｔ ａｓ ｔｏ ｆｅｅｄｉｎｇ ｄａｍａｇｅ，ｔｈｅ ｒｉｃｅ ｃａｎ ｒｅａｃｔ ｔｏ ｅｇｇ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ＢＰＨ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅ ｄｅｆｅｎｓｉｖｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ，ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ ｃｏｎｃｔｒｏｌ ｔｈｅ ｆｕｒｔｈｅｒ ｄａｍａｇｅ ｏｆ ＢＰＨ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ；Ｎｉｌａｐａｒｖａｔａ ｌｕｇｅｎｓ（ＳｔＭ）；ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ；ｂｏｗｍａｎ ｂｉｒｋ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ 植食性昆虫与寄主植物的接触包括取食和产卵 莉酸、水杨酸和乙烯为主的一系列信号途径，启动 植物的直接或者间接防御体系¨ Ｊ。 两个方面。取食既对植物组织造成了物理损伤，也 掠夺了寄主的营养，因而是普遍关注的焦点。近 １０多年来，随着植物对昆虫取食反应的分子机理 方面研究的深入，植物诱导抗虫性机理越来越清 楚。植物在遭受植食性昆虫取食为害后，通过以茉 植食性昆虫无论是将卵产在植物表面还是组织 内，卵本身对寄主植物并没有直接危害。但产卵过 程导致的机械损伤或是卵壳表面携带的化学物质会 对植物产生影响，尤其是将卵产在组织内的昆虫， 收稿日期：２０１０—１２—１０ 基金项目：国家自然科学基金资助项目（３１０７１６８０，３０７７１４５８） 作者简介：解晓军（１９８６年生），男，硕士；通讯作者：周强；Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｓｓｚｈｏｕ＠ｍａｉｌ．ｓｙｓｕ．ｅｄｕ．Ｃｌｌ 第５期 解晓军等：水稻胰蛋白酶抑制剂对褐飞虱产卵刺激的响应 １０５ 不仅其产卵器会对寄主组织造成伤害，而且产卵液 会进入植物组织，植物也势必对这些外来刺激产生 反应。从生态策略上来说，产卵刺激为寄主植物提 供了进攻者后代数量等方面的信息，因此，植物完 全有可能对植食性昆虫的产卵行为产生反应。植物 对昆虫产卵诱导产生的防御反应的最大收益在于通 过减少卵的存活数，阻滞幼虫或正在产卵的雌虫的 生长发育，从而避免将来更大规模的取食为害 Ｊ。 对双子叶模式植物拟南芥Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ的研究表 明，植食性昆虫的产卵与取食一样也能诱导植物产 生各种防御反应 Ｉ９ Ｊ，主要表现为通过产生挥发物 吸引天敌，起到间接防御作用 。Ｄａｗｎ等通过基 因芯片技术研究两种菜粉蝶产卵对拟南芥的影响 时，发现产卵特异性诱导了拟南芥的全面防御反 应¨１ 。但目前尚无昆虫产卵诱导单子叶模式植物 水稻Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ产生防御反应方面的研究报道， 而从褐飞虱Ｎｉｌａｐａｒｖａｔａ ｌｕｇｅｎｓ（Ｓｔｌｉ１）产卵特点来 看，其危害方式完全有可能诱导水稻产生更强的防 御反应。褐飞虱的产卵方式与蝶类不同，蝶类将卵 产在叶表面，不会直接对叶片产生机械损伤；而褐 飞虱用产卵器刺破水稻植株表皮，将卵块产在叶鞘 组织内，其危害部位和深度与其对水稻的取食过程 有高度的相似性，有可能像水稻应对褐飞虱取食一 样－．卜 ，启动水稻的防御反应。 胰蛋白酶抑制剂（Ｂｏｗｍａｎ Ｂｉｒｋ Ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ Ｉｎ— ｈｉｂｉｔｏｒ，ＢＢＰＩ）是一种典型的植物防御相关蛋白， 也是研究最为详细的植物防御物质，它通过影响昆 虫对食物的消化而达到防御目的 ，并被认为是 一种有效的防御物质而在转基因抗虫植物中得到了 广泛应用¨ 。此外，ＢＢＰＩ合成酶基因也是茉莉 酸信号途径的标志基因¨ 。本研究以单子叶模 式植物水稻及其主要害虫褐飞虱产卵为切入点，以 典型的植物防御相关蛋白水稻ＢＢＰＩ为指标，分析 水稻对褐飞虱产卵刺激的响应，以期为研究水稻应 对褐飞虱产卵的防御反应提供证据，并为深入了解 产卵诱导植物产生防御反应的分子机理提供信息。 １材料与方法 １）水稻品种：选用标准感性品种ＴＮ１，种子 于室内催芽后，分期单株移至塑料杯内（直径５ ｅｍ×７ ｃｍ），在人工气候箱内培养，温度（２７±１） ℃、相对湿度８０％、光照１４ Ｌ：１０ Ｄ。秧龄２０ ｄ时 供试。 ２）虫源：褐飞虱于采自广东省华南农业大学 农场稻田，在室内感性品种七袋占上饲养多代。温 度（２７±１）ｃｃ、相对湿度８０％、光照１４ Ｌ：１０ Ｄ。 ３）水稻处理：取盆栽水稻进行如下处理，褐 飞虱产卵处理：在每株水稻幼苗的叶鞘部位接３头 剪除口针的羽化后３天的褐飞虱怀卵雌虫（处于 产卵高峰期），分别处理水稻０（对照），６，１２， ２４，３６，４８ ｈ。褐飞虱取食处理：在每株水稻幼苗 的叶鞘部位接３头３龄的褐飞虱若虫，分别处理水 稻０（对照），６，１２，２４，３６，４８ ｈ。机械损伤处 理：在每株水稻幼苗的叶鞘部位用已消毒的４号昆 虫针刺２０下，分别处理水稻０（对照），．６，１２， ２４，３６，４８ ｈ。以上每个处理重复３次。 ４）基因表达的测定：用ＲＴ—ＰＣＲ的方法测定 不同处理对水稻防御相关基因表达的影响。取不同 处理的水稻叶片１００ ｍｇ，在液氮冷冻条件下碾成 粉末，在液氮挥发完全前将其移入２ ｍＬ的离心管， Ｔｒｉｚｏｌ试剂盒（ＧｉｂｃｏＢＲＬ）提供的方法提取水稻总 ＲＮＡ。取１ ｇ不同处理的水稻叶片总ＲＮＡ，Ｉｎｖｉｔｒｏ— ｇｅｎ公司的ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ ＩＩ逆转录（ＲＴ）试剂盒合 成ｃＤＮＡ第一链。ＰＣＲ扩增用ｒＴａｑ ＤＮＡ聚合酶 （ＴａＫａＲａ），扩增条件：９４℃４５ Ｓ，５５ ｏＣ ４５ Ｓ，７２ ℃４５ Ｓ，３０个循环后于７２℃延伸８ ｍｉｎ。逆转录 及ＰＣＲ所用特异性引物见表１。取５ Ｌ ＰＣＲ产物进 行琼脂糖（Ｗ＝１％）电泳。每个处理设３个重复。 荧光定量ＰＣＲ的方法测定不同处理对水稻蛋白酶 抑制剂基因表达的影响。水稻ＲＮＡ的提取方法同 上，取１ ｇ不同处理的水稻叶片总ＲＮＡ，ＴａＫａＲａ 公司的ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔⅢ逆转录（ＲＴ）试剂盒合成ｃＤ— ＮＡ第一链。用于荧光定量ＰＣＲ的日 ，的特异引 物和内参基因Ａｃｔｉｎ引物分别设计为：ＱＰＩ．Ｆ：５ ． ＧＣＴＣＡＴＣＴＧＣＧＡＧＧＡＣＡＴＣＴ－３ ，ＱＰＩ—Ｒ：５ ・ＴＦＣＣＴ— ＣＡＴＧＧＴＣＣＡＣＡＣＡＡＧ－３ ，ＱＡｃｔｉｎ—Ｆ：５ 一ＡＣＴＧＴＣ— ＣＣＣＡＴＣＴＡＴＧＡＡＧＧＡ－３ ，ＱＡｃｔｉｎ—Ｒ：５ 一ＣＴＧＣＴＧ— ＧＡＡＴＧＴＧＣＴＣＡＧＡＧＡ－３ 。据ＳＹＢＲ Ｐｒｅｍｉｘ Ｅｘ Ｔａｑ （Ｐｅｒｆｅｃｔ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ）Ｋｉｔ提供的方法，用ＡＢＩ Ｐｒｉｓｍ ７９００ＨＴ进行荧光定量ＰＣＲ，运行条件为：预变性： ９５℃，３０ Ｓ，１个循环；ＰＣＲ反应：９５℃，５ Ｓ； ６Ｏ℃，３０～３４ Ｓ，４０个循环。每个处理取３个样 品，每个样品的ＲＮＡ反转录的ｃＤＮＡ在每次荧光 定量ＰＣＲ时进行３个重复，重复运行３次。蛋白 酶抑制剂基因的相对拷贝数根据２一ＡＡＣＴ方法＿２ 进行分析。 ５）水稻蛋白酶抑制剂ＰＩ含量的测定：酶液的 提取：参照Ｗａｒｄ等 的方法。取处理后的水稻幼 苗植株，称量，按ｍ： ＝１：１０的 比例加入０．２ ｍｏｌ／Ｌ的Ｔｒｉｓ—ＨＣ１缓冲液（ｐＨ ７．８）内含Ｗ＝ 中山大学学报（自然科学版） 第５０卷 ０．１％Ｔｗｅｅｎ－２０，冰浴匀浆，匀浆液在４ ｏＣ，１ ５００ ｒ／ｍｉｎ离心１５ ｍｉｎ，上清液作为粗酶液。ＢＢＰＩ含量 测定：取０．２ ｍＬ酶液和０．５ ｍＬ的０．１ ｇ／ｔｘＬ的胰 蛋白酶溶液在室温下振荡混合１０ ｍｉｎ，加入１００ 再在１２ ０００ ｒ／ｍｉｎ下离心１０ ｍｉｎ，取１００ Ｌ的上 清液和１００ Ｌ的０．５ ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ，在ＤＬＡＢ全 自动酶标仪上于４５０ ｎｍ下检测吸光度值，以ＢＢＰＩ 绘制标准曲线，结果以 ｍｇ蛋白表示，总蛋白 一 Ｌ的２５ ｍｇ／ｍＬ偶氮酪蛋白，３７℃培育３０ ｒａｉｎ， 含量用Ｂｒａｄｆｏｒｄ方法测定 。 一 ～ 表１ ＰＣＲ所用基因特异引物 Ｔａｂｌｅｌ Ｇｅｎｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐｒｉｍｅｒ ｆｏｒ ＰＣＲ ２结果 ＰＲ１，ＰＲ２，ＰＲ３均属病原相关蛋白，在植物 抗病虫防御体系中起重要作用。褐飞虱产卵对病原 相关基因ＰＲ１和ＰＲ３的表达都有诱导作用，但是 对 的表达没有诱导作用。褐飞虱取食也能诱 导Ｐ ２和ＰＲ３的表达，而机械损伤对这三个基因 ２．１ 褐飞虱产卵诱导水稻蛋白酶抑制剂合成酶基 因（ＢＢＰＩ）的表达 ＢＢＰＩ通过影响昆虫对植物进行消化的蛋白酶 的活性而在植物虫害防御中去重要作用。褐飞虱产 卵能诱导水稻ＢＢＰＩ的表达，机械损伤和褐飞虱取 食也都能诱导蛋白酶抑制剂ＢＢＰＩ的表达，其中褐飞 虱产卵和取食的诱导作用要强于机械损伤（图１）。 的表达都没有诱导作用（图１）。 水稻植株ＢＢＰＩ的定量检测表明：褐飞虱产卵 能比较显著的诱导ＰＩ基因的表达，并且基因的表 达量随处理时间的延长呈先上升后下降的趋势。产 卵刺激后１２ ｈ的ＰＩ基因的表达量最高，为对照的 ５２１ ｂｐ ２．９９倍，并且显著高于６ ｈ和２４ ｈ的表达量，但 是６ ｈ与２４ ｈ之间的表达量差异不显著，而３６ ｈ 和４８ ｈ时，ＢＢＰＩ的表达量基本上回复到了对照的 水平（图２）。 将褐飞虱产卵对ＢＢＰＩ的定量诱导表达作用与 ３２１ ｂｐ ５７８ ｂｐ ４１３ ｂｐ 其它处理方式进行对比，产卵刺激的前期（６ ｈ和 １２ ｈ），叶片胰蛋白酶抑制剂基因的表达均显著高 于取食和机械损伤。处理后６ ｈ，褐飞虱产卵与褐 飞虱取食和机械损伤之间对基因的定量诱导表达作 用差异显著，褐飞虱产卵处理的诱导作用显著强于 图１ 防御物质相关基因在褐飞虱产卵水稻中的表达 Ｆｉｇ．１ Ｄｅｆｅｎｓｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ＢＰＨ ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ ｉｎ ｒｉｃｅ ＢＢＰＩ：蛋白酶抑制剂合成酶基因；ＰＲ～１：酸性病原相 取食处理；处理后１２ ｈ，褐飞虱产卵的诱导作用与 其它两种处理方式差异显著。 关蛋白基因；ＰＲ一２：葡聚糖酶基因；ＰＲ一３：几丁质酶 基因；Ａｃｔｉｎ：肌动蛋白基因．ＣＫ：健康植株；ＭＴ：机械 损伤植株；兀’：取食为害植株；ＯＴ：产卵为害植株 第５期 解晓军等：水稻胰蛋白酶抑制剂对褐飞虱产卵刺激的响应 ３ ２ ｌ Ｏ 藿 ５ ３ ５ ２ ５ １ ５ ０ 鼋 吞 ∞ ６ｈ ｌ２ｈ ２４ｈ ３６ｈ ４８ｈ 处理时间／ｈ 图２定量ＰＣＲ检测不同处理方式对水稻 ＢＢＰ１的诱导表达 Ｆｉｇ．２ Ｒｉｃｅ ＢＢＰＩ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ＰＣＲ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ＣＫ：健康植株；ＭＴ：机械损伤植株；ＦＴ：褐飞虱取食处 理植株；ＯＴ：褐飞虱产卵处理植株；６—４８ ｈ：产卵分别 处理６～４８ ｈ；同组不同字母之间代表差异显著， Ｓｔｕｄｅｎｔ—Ｎｅｗｍａｎ—Ｋｅｕｌｓ检验（Ｐ＜０．０５） ２．２ 褐飞虱产卵对水稻蛋白酶抑制剂（ＢＢＰＩ） 含量变化的影响 水稻植株ＢＢＰＩ含量检测表明：与对照相比， 褐飞虱产卵能比较显著的诱导ＢＢＰＩ含量上升，对 照植株与褐飞虱产卵处理后６，１２，２４，３６，４８ ｈ 水稻ＢＢＰＩ的含量分别为每ｇ蛋白１０．７７，１１．１３， １３．Ｏ５，１２．４７，１０．９２和１Ｏ．９７ ｍｇ。褐飞虱产卵诱 导下ＢＢＰＩ的含量逐渐上升，１２ ｈ时达到最大值， 含量上升状态一直持续到处理后２４ ｈ，随后开始下 降，处理后３６ ｈ，ＢＢＰＩ的含量基本上回复到对照 水平（图３）。 ６ｈ １２ｈ ２４ｈ ３６ｈ ４８ｈ 处理时间ｍ 图３不同处理方式对水稻ＢＢＰＩ含量变化的影响 Ｆｉｇ．３ Ｒｉｃｅ ＢＢＰＩ ｌｅｖｅｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ ＣＫ：健康植株；ＭＴ：机械损伤植株；ＦＴ：褐飞虱取食处 理植株；ＯＴ：褐飞虱产卵处理植株；６—４８ ｈ：产卵分别 处理６～４８ ｈ；同组不同字母之间代表差异显著， Ｓｔｕｄｅｎｔ—Ｎｅｗｍａｎ—Ｋｅｕｌｓ检验（Ｐ＜０．０５） 将褐飞虱产卵对水稻ＢＢＰＩ含量的诱导作用与 其它处理方式进行对比发现：褐飞虱产卵，取食和 机械损伤处理下ＢＢＰＩ的含量都是先上升后下降， 产卵处理下的ＢＢＰＩ含量的最高值要低于褐飞虱取 食处理下的最高值，并且达到最高值的时间（处 理后１２ ｈ）晚于取食处理的６ ｈ；褐飞虱产卵与机 械损伤处理下ＢＢＰＩ的含量差异不显著，但是褐飞 虱取食处理下ＢＢＰＩ的含量为每ｇ蛋白１３．６８ ｍｇ， 明显高于前两种处理（ｄ，＝３，Ｆ＝１ １８５，Ｐ＝ ０．００１）（图３）。 ３讨论 昆虫在和植物的长期协同进化过程中，发展了 许多独特的保护及适应机制 。植食性昆虫产卵 行为有丰富的生态学功能，如雌性昆虫的产卵液中 含有雄性个体在交配过程中传递的附腺分泌物和雌 性自身的分泌物，能同时表达雌雄个体的信息；通 过在卵表面增加覆盖物以防卫来自捕食者、寄生 者、病原微生物等自然天敌的攻击和防止水分散失 过多的作用 。最近的研究发现多种昆虫卵内含 有与抗病虫相关的信号物质茉莉酸和水杨酸 ， 这表明产卵在植物与昆虫相互关系中可能起着重要 而又复杂的作用。 对水稻诱导抗虫反应的研究表明：褐飞虱取食 和产卵刺激都能诱导水稻产生ＢＢＰＩ，但是二者之 问的诱导强度以及发挥诱导作用的时问存在着一定 的差异，产卵处理下，ＢＢＰＩ量的变化呈先上升后 下降的趋势；而取食处理诱导的变化趋势没有这么 明显，持续时间更长。褐飞虱产卵为害诱导ＢＢ 的表达量达到最大值的时间基本上都晚于褐飞虱取 食为害，并且产卵处理下防御基因表达量的最高值 一般都低于取食处理。其原因可能是褐飞虱产卵处 理的为害程度较小从而造成了诱导作用的延后发 挥，或者是由于褐飞虱取食和产卵分别是通过不同 的途径来激活水稻的防御，从而导致基因表达量达 最大值时诱导时问的差异，这需要进一步的深入研 究。 产卵诱导水稻ＢＢＰＩ的产生，并可能参与启动 植物的超敏反应。由于产卵诱导的ＢＢＰＩ在３６ ｈ后 就下降到对照水平，而幼虫可能需要９～１０ ｄ才能 孵化 ，因此，卵诱导产生的ＢＢＰＩ也就无法起到 抑制幼虫取食的作用。实验中发现：褐飞虱将卵产 在水稻组织内后形成产卵痕，产卵痕周围的水稻组 织会出现细胞坏死的现象，从而形成明显的产卵 斑，这与在不相容的植物一病原物互作中寄主受病 原物侵染的部位出现的坏死斑相似。由于ＢＢＰＩ不 仅是植物抵抗昆虫取食的一个重要因子，而且还能 １Ｏ８ 中山大学学报（自然科学版） 第５０卷 微生物对植物的入侵行为 。因此推测，褐 飞虱产卵诱导的ＢＢＰＩ可能首先参与水稻产生超敏 反应，抵抗伤口感染微生物。褐飞虱将卵产在水稻 的叶鞘组织内的过程中，水稻受到双重伤害，即褐 飞虱的产卵器不仅伤害了水稻组织，而且将卵留在 了水稻组织内。产卵痕周围组织的坏死可能有两方 面的原因，一是产卵器的直接伤害而导致组织细胞 失水枯死；二是水稻对褐飞虱产卵或留在组织内的 卵产生超敏反应，水稻组织出现程序性坏死。褐飞 虱卵与水稻组织被隔离开来，胚胎发育因缺少水分 供应受到影响，最终对卵产生直接防御作用。 植物能够及时的启动防御反体系应对昆虫产 卵，从而有效的阻止孵化出的幼虫对其造成的取食 为害，这种早期预警行为消耗的时间和能量比较 少，所以在一年生植物中比在多年生植物中常见， 具体阐述一年生植物如何平衡这种“成本一收 益”，可能需要更多的对发育和生殖参数方面的研 究 。 产卵诱导植物产生防御反应的激发子特性现在 仍然不知道，但是推测和包被在卵表面的输卵管分 泌物有关 。如果昆虫卵只是与植物表面接触并 且产卵过程中没有对植物造成伤害，则能诱导植物 做出防御的与卵有关的诱导因子需要与植物的表皮 细胞相接触，然后诱导因子要么是高亲脂性的以透 过植物表面的蜡层，要么需要具有切开植物表皮的 功能。一旦诱导因子到达表皮细胞后，它会通过受 体或者形成通道的方式进入细胞。如果昆虫产卵时 对植物造成了伤害，诱导因子就会通过被破坏的细 胞膜进入细胞。因此，深入对昆虫产卵液中的信号 刺激物的研究是解决植物一昆虫产卵相互关系的突 破口 参考文献： 娄永根，程家安．植物的诱导抗虫性［Ｊ］．昆虫学报， １９９７，４０（３）：３２０—３３１． ［２］ ＡＲＩＭＵＲＡ Ｇ，ＫＯＳＴ Ｃ，ＢＯＬＡＮＤ Ｗ．Ｈｅｒｂｉｖｏｒｅ—ｉｎ— ｄｕｃｅｄ ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｐｌａｎｔ ｄｅｆｅｎｃｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ— ｉｃａ Ａｃｔａ，２００５，１７３４（２）：９１—１１１． ［３］ ＬＥＩＴＮＥＲ Ｍ，ＢＯＬＡＮＤ Ｗ，ＭＩＴＨＯＦＥＲ Ａ．Ｄｉｒｅｃｔ ａｎｄ ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｄｅｆｅｎｃｅｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｐｉｅｒｃｉｎｇ－－ｓｕｃｋｉｎｇ ａｎｄ ｃｈｅ．－ ｗｉｎｇ ｈｅｒｂｉｖｏｒｅｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｇｏ ｔｒｕｎｃａｔｕｌａ［Ｊ］．Ｎｅｗ Ｐｈｙｔｏｌ— ｏｇｉｓｔ，２００５，１６７（２）：５９７—６０６． ［４］ ＣＨＥＮ Ｍ Ｓ．Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｄｉｒｅｃｔ ｐｌａｎｔ ｄｅｆｅｎｓｅ ａｇａｉｎｓｔ ｉｎｓｅｃｔ ｈｅｒｂｉｖｏｒｅｓ：Ａ ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．Ｉｎｓｅｃｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００８，１５（２）： １０１一ｌ１４． ［５］ 卢凯，李欣，周嘉良，等．虫害诱导的水稻挥发物抑 制水稻病原菌的生长［Ｊ］．科学通报，２０１０，５５（３０）： ２９２５—２９３０ ［６］ＨＩＬＫＥＲ Ｍ，ＫＯＢＳ Ｃ，ＶＡＲＡＭＡ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｓｅｃｔ ｅｇｇ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ｉｎｄｕｃｅｓ Ｐｉｎｕｓ ｓｙｌｖｅｓｔｒｉｓ ｔｏ ａｔｔｒａｃｔ ｅｇｇ ｐａｒａｓｉｔ— ｏｉｄｓ［Ｊ］．Ｊ Ｅｘｐ Ｂｉｏｌ，２００２，２０５（４）：４５５—４６１． ［７］ＤＯＳＳ Ｒ Ｐ，ＯＬＩＶＥＲ Ｊ Ｅ，ＰＲＯＥＢＳＴＩＮＧ Ｗ Ｍ，ｅｔ ａ１． Ｂｒｕｃｈｉｎｓ：ｉｎｓｅｃｔｄｅｒｉｖｅｄ ｐｌａｎｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ ｔｈａｔ ｓｔｉｍｕｌａｔｅ Ｂｅ— ｏｐｌａｓｍ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，２０００， ９７（１１）：６２１８—６２２３． ［８］ ＢＡＬＢＹＳＨＥＶ Ｎ Ｆ，ＬＯＲＥＮＺＥＮ Ｊ Ｈ．Ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｅｇｇ ｄｒｏｐ：ａ ｎｏｖｅｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｈｏｓｔ ｐｌａｎｔ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ Ｃｏｌｏｒａｄｏ ｐｏｔａｔｏ ｂｅｅｔｌｅ（Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒａ：Ｃｈｒｙｓｏｍｅｌｉｄａｅ） ［Ｊ］．Ｊ Ｅｃｏｎ Ｅｎｔｏｍｏｌ，１９９７，９０（２）：６５２—６５７． ［９］ＨＩＬＫＥＲ Ｍ，ＭＥＩＮＥＲＳ Ｔ．Ｅａｒｌｙ ｈｅｒｂｉｖｏｒｅ ａｌｅｒｔ：ｉｎｓｅｃｔ ｅｇｇｓ ｉｎｄｕｃｅ ｐｌａｎｔ ｄｅｆｅｎｓｅ［Ｊ］．Ｊ Ｃｈｅｍ Ｅｃｏｌ，２００６，３２ （７）：１３７９—１３９７． ［１０］ ＫＯＰＫＥ Ｄ，ＳＣＨＲＯＤＥＲ Ｒ，ＦＩＳＣＨＥＲ Ｈ Ｍ，ｅｔ ａ１． Ｄｏｅｓ ｅｇｇ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ｂｙ ｈｅｒｂｉｖｏｒｏｕｓ ｐｉｎｅ ｓａｗｆｌｙ ａｆｆｅｃｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｅ ｓｙｎｔｈａｓｅｓ ｉｎ ｐｉｎｅ？［Ｊ］． Ｐｌａｎｔａ，２００８，２２８（３）：４２７—４３８． ［１１］ＤＡＷＮ Ｌ．ＣＡＲＯＬＩＮＥ Ｇ Ｄ．ＦＲＩＥＤＥＲＩＫＥ Ｂ，ｅｔ ａ１． Ｏｖｉｐｏｓｉｔｉｏｎ ｂｙ ｐｉｅｒｉｄ ｂｕｔｔｅｒｆｌｉｅｓ ｔｒｉｇｇｅｒｓ ｄｅｆｅｎｓｅ ｒｅｓｐｏｎ— ｓｅｓ ｉｎ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００７，１４３（２）： ７８４—８００． ［１２］ 徐涛，周强，夏嫱，等．虫害诱导的水稻挥发物对褐 飞虱寄主选择行为的影响［Ｊ］．科学通报，２００２，４７ （１１）：８４９—８５３． ［１３］ＬＯＵ，Ｙ Ｇ，ＨＵＡ Ｘ Ｙ，ＴＵＲＬＩＮＧＳ Ｔ Ｃ Ｊ，ｅｔ ａ１． Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｉｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ｖｏｌａｔｉｌｅ ｅｍｉｓｓｉｏｎｓ ａｍｏｎｇ ｒｉｃｅ ｖａ— ｒｉｅｔｉｅｓ ｒｅｓｕｌｔ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ａｔｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐａｒａｓｉｔｉｓｍ ｏｆ Ｎｉｌａｐａ￣ａｔａ ｌｕｇｅｎｓ ｅｇｇｓ ｂｙ ｔｈｅ ｐａｒａｓｉｔｏｉｄ Ａｎａｇｒｕｓ ｎｉ— ｌａｐａｒｖａｔａｅ ｉｎ ｔｈｅ ｆｉｅｌｄ［Ｊ］．Ｊ Ｃｂｅｍ Ｅｃｏｌ，２００６，３２ （１１）：２３７５—２３８７． ［１４］ＨＡＯ Ｐ，ＬＩＵ Ｃ，ＷＡＮＧ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｈｅｒｂｉｖｏｒｅ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｃａｌｌｏｓｅ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｓｉｅｖｅ ｐｌａｔｅｓ ｏｆ ｒｉｃｅ：ａｎ ｉｍｐｏｒ— ｔａｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｆｏｒ ｈｏｓｔ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ ｐｈｙｓｉｏｌ， ２００８，１４６（４）：１８１０—１８２０． ［１５］ＢＨＡＴＴＡＣＨＡＲＹＹＡ Ａ，ＬＥＩＧＨＴＯＮ Ｓ Ｍ，ＢＡＤＵ Ｃ Ｒ． Ｂｉｏｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ａｒｃｈｉｄｅｎｄｒｏｎ ｅｌｌｉｐｔｉｃｕｍ ｔｒｙｐｓｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｎ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｓｅｒｉｎｅ ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｅｎｚｙｍｅｓ ｄｕｒｉｎｇ ｌａｒｖａｌ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｓｐ０ｄ０ｐ￡ｅｒ８ ｌｉｔｕｒａ ．Ｃｏｍｐａｒａ— ｔｉｖｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ．２００７，１４５（４）：６６９ —６７７． ［１６］ＴＡＭＨＡＮＥ Ｖ Ａ，ＣＨＯＵＧＵＬＥ Ｎ Ｐ，ＧＩＲＩ Ａ Ｐ，ｅｔ ａ１． Ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ Ｃａｐｓｉｃｕｍ ａｎｎｕｍ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｎ Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ ａｒｍｉｇｅｒａ ｇｕｔ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ［Ｊ］． Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ，２００５，１７７２（２）：１５６— １６７． １ １７］ＯＬＩＶＥＩＲＡ Ａ Ｓ，ＭＩＧＬＩＯＬＯ Ｌ，ＡＱＵＩＮＯ Ｒ Ｏ．ｅｔ ａ１． 第５期 解晓军等：水稻胰蛋白酶抑制剂对褐飞虱产卵刺激的响应 １０９ Ｐｕｒｉｉｆｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｔｒｙｐｓｉｎ・－ｐａｐａｉｎ ｉｎ—－ ｈｉｂｉｔｏｒ ｆｒｏｍ Ｐｉｔｈｅｃｅｌｏｂｉｕｍ ｄｕｍｏｓｕｍ ｓｅｅｄｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｅｆｆｅｃｔｓ ｔｏｗａｒｄｓ ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｅｎｚｙｍｅｓ ｆｒｏｍ ｉｎｓｅｃｔ ｐｅｓｔｓ ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００７，４５ （１０）：８５８—８６５． ［１８］ ＲＹＡＮ Ｃ Ａ．Ｔｈｅ ｓｙｓｔｅｍｉｎ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ：Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉ— ｌａ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｄｅｆｅｎｓｉｖｅ ｇｅｎｅｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏ— ｐｈｙｓ Ａｃｔａ，２０００，１４７７（１—２）：１１２—１２１． ［１９］ ＢＯＴＥＬＨＯ Ｊ Ｓ，ＳＩＱＵＥＩＲＡ Ｊ Ｃ Ｌ，ＪＡＲＤＩＭ Ｂ Ｃ，ｅｔ ａ１． Ｔｒｙｐｓｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｉｎ ｐａｓｓｉｏｎ ｆｒｕｉｔ（Ｐａｓｓｉｌｆｏｒａ ｆ．ｅｄｕｌｉｓ ｌｆａｖｉｃａｒｐａ）ｌｅａｖｅｓ：ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｍｅｔｈｙｌ ｊａｓｍｏｎａｔｅ，ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ｗｏｕｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｈｅｒｂｉｖｏｒｙ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ａｎｄ Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００８，５６ （２０）：９４０４—９４０９． ［２０］ ＨＵＭＭＥＬ Ｇ Ｍ，ＳＣＨＵＲＲ Ｕ，ＢＡＬＤＷＩＮ Ｉ Ｔ，ｅｔ ａ１． Ｈｅｒｂｉｖｏｒｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｊａｓｍｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｂｕｒｓｔｓ ｉｎ ｌｅａｖｅｓ ｏｆ Ｎ／ｃ— ｏｔｉａｎａ ａｔｔｅｎｕａｔａ ｍｅｄｉａｔｅ ｓｈｏｒｔ．ｔｅｒｍ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｒｏｏｔ ｇｒｏｗｔｈ［Ｊ］．Ｐｌｎａｔ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，２００９，３２ （２）：１３４—１４３． ［２１］ＺＨＯＵ Ｇ Ｘ，ＱＩ Ｊ Ｆ，ＲＥＮ Ｎ，ｅｔ ａ１．Ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ＯｓＨＩ－ ＬＯＸ ｍａｋｅｓ ｒｉｃｅ ｍｏｒｅ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ ｔｏ ｃｈｅｗｉｎｇ ｈｅｒｂｉ－ ｖｏｒｅｓ，ｂｕｔ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｔｏ ａ ｐｈｌｏｅｍ ｆｅｅｄｅｒ［Ｊ］． Ｐｌａｎｔ Ｊ，２００９，６０（４）：６３８—６４８． ［２２］ ＬＩＶＡＫ Ｋ Ｊ，ＳＣＨＭＩＴｒＧＥＮ Ｔ Ｄ．Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｒｅｌａｔｉｖｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄａｔａ ｕｓｉｎｇ ｒｅａｌ—ｔｉｍｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＰＣＲ ａｎｄ ｔｈｅ ２一ＡＡＣＴ Ｍｅｔｈｏｄ［Ｊ］．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２００１，２５ （４）：４０２—４０８． ［２３］ ＷＡＲＤ Ｋ Ａ，ＴＵＮＧ Ｐ，ＬＡＭＢ Ｎ，ｅｔ ａ１．Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｒｅ— ｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｆｏｒ ｂｉｏｌｏｇｉｃｌａｌｙ ａｃｔｉｖｅ ｊａｓｍｏｎａｔｅｓ：Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ ｃｏｔｙｌｅｄｏｎ ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ［Ｊ］． Ｐｌａｎｔ Ｇｒｏｗｔｈ Ｒｅｇｕｌ，１９９９，２７（１）：４９—５６． ［２４］ ＢＲＡＤＦＯＲＤ Ｍ Ｍ．Ａ ｒａｐｉｄ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｉｃｒｏｇｒａｍ ｑｕａｎｔｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ ｕｔｉｌｉｚｉｎｇ ｔｈｅ ｐｒｉｎｃｉｐａｌ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ—ｄｙｅ ｂｉｎｄｉｎｇ［Ｊ］．Ａｎａｌ Ｂｉｏ－ ｃｈｅｍ．１９７６，７２：２４８—２５４． ［２５］ ＢＡＬＷＤＩＮ Ｉ Ｔ．Ａｎ ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ｍｏｔｉｖａｔｅｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｐｌａｎｔ．ｈｅｒｂｉｖｏｒｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｎａｔｉｖｅ ｔｏｂａｃｃｏ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００１，１２７（４）：１４４９—１４５８． ［２６］ ＨＩＬＫＥＲ Ｍ，ＭＥＩＮＥＲＳ Ｔ．Ｃｈｅｍｏｅｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｉｎｓｅｃｔ Ｅｇｇｓ ａｎｄ Ｅｇｇ Ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ［Ｍ］．Ｍａｌｄｅｎ：Ｗｉｌｅｙ Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ， ２００２：３—３１． ［２７］ ＴＯＯＫＥＲ Ｊ Ｆ．ＤＥ ＭＯＲＡＥＳ Ｃ Ｍ．Ｊａｓｍｏｎａｔｅ ｉｎ ｌｅｐｉ－ ｄｏｐｔｅｒａｎ ｅｇｇｓ ａｎｄ ｎｅｏｎａｔｅｓ［Ｊ］．Ｊ Ｃｈｅｍ Ｅｃｏｌ，２００５， ３１（１１）：２７５３—２７５９ ［２８］ 程遐年，吴进才，马飞．褐飞虱研究与防治［Ｍ］．北 京：中国农业出版社，２００２：４７—４８． ［２９］ ＴＡＭＡＹＯ Ｍ Ｃ。ＲＵＦＡＴ Ｍ，ＢＲＡＶＯ Ｊ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａｃｃｕ— ｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｍａｉｚｅ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｉｎ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｗｏｕｎｄｉｎｇ ａｎｄ ｉｎｓｅｃｔ ｆｅｅｄｉｎｇ，ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｔｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｏｗａｒｄ ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ｏｆ Ｓｐｏａｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｔｏｒｌ— ｉｓ ｌａｒｖａｅ［Ｊ］．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２０００，２１１（１）：６２—７１． ［３０］ ＨＡＩＬＥ Ｆ Ｊ．ＨＩＧＬＥＹ Ｌ Ｇ．Ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｓｏｙｂｅａｎ ｇａｓ－ｅｘ－ ｃｈａｎｇｅ ａｆｔｅｒ ｍｏｉｓｔｕｒｅ ｓｔｒｅｓｓ ａｎｄ ｓｐｉｄｅｒ ｍｉｔｅ ｉｎｊｕｒｙ［Ｊ］． Ｅｎｖｉｒｏｎ Ｅｎｔｏｍｏ１．２００３，３２（３）：４３３—４４０． ［３１］ ＳＣＨＲＯＤＥＲ Ｒ。ＦＯＲＳＴＲＥＵＴＥＲ Ｍ，ＨＩＬＫＥＲ Ｍ．Ａ ｐｌａｎｔ ｎｏｔｉｃｅｓ ｉｎｓｅｃｔ ｅｇｇ ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｔｓ ｒａｔｅ ｏｆ ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ，２００５，１３８（１）： ４７０—４７７．
