第２１卷第６期 ２ＯＯ８年１２月 华夏医学 Ｖｏ１．２１ Ｎｏ．６ Ｄｅｃ．２Ｏ０８ Ａｃｔａ Ｍｅｄｉｃｉｎａｅ Ｓｉｎｉｃａ 五味子糖浆中防腐剂的防腐效力测定 吴潇① （桂林食品药品检验所，广西桂林５４１ＯＯ２） 摘要：目的：测定五味子糖浆中防腐剂对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌和黑曲霉菌的抑菌 作用。方法：将５种微生物接种在五味子糖浆中，经不同时间用微生物限度检查法测定其防腐效力。结果：五味子糖浆 防腐剂对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌有较强的抑菌作用。结论：五味子糖浆中防腐剂的 防腐效力符合《美国药典》标准。 关键词：五味子糖浆；防腐剂；防腐效力 中图分类号：Ｒ９５４ 文献标识码：Ａ 文章编号：１ＯＯ８—２４Ｏ９（２ＯＯ８）Ｏ６—１０６９一Ｏ２ Ｔｅｓｔ ｏｎ ｔｈｅ ａｎｔｉｓｅｐｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ ｉｎ ｗｕｗｅｉｚｉ ｓｙｒｕｐ／ｗｕ ｘｉａｏ∥ＧｕｉＩｊｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｆ０ｒ Ｄｒｕｇ ｃｏｎｔｒｏＩ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ ＺｈＩＩａｎｇ ＡｕｔＯｎＯｍＯｕｓ Ｒｅｇｉ０ｎ，ＧｕｉＩｉⅡ５４１ＯＯ２，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：（）ｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｂ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ａｎｔｉｓｅｐｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ｉｎ Ｗｕｗｅｉｚｉ ｓｙｒｕｐ ｏｎ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ，ｓｔａｐｈｙＩｏｃｏｃ— ｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ，ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ，Ｃａｎｄｉｄａ ａＩｂｉｃａｎｓ ａｎｄ ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ．ＩⅥｅｔｈｏｄｓ：Ｉｎｏｃｕｌａｔｅ ５ ｋｉｎｄｓ ０ｆ ｍｉｃｒ０ｏｒ～ ｇａｎｉｓｍｓ ｉｎ Ｗｕｗｅｉｚｉ ｓｙｒｕｐ，ｔｈｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｄｅｃａｙ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｌｉｍｉｔ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅｓ． Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｓｔｒｏｎｇｅｒ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｆｏｒ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ，ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ，ｐｓｅｕｄｏｍ０ｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎ０ｓａ， Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ａｎｔｉｓｅｐｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ｉｎ Ｗｕｗｅｉｚｉ ｓｙｒｕｐ ｍｅｔ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ＵＳＰ ｖｅｒｓｉｏｎ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｗｕｗｅｉｚｉ ｓｙｒｕｐ；ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ；ａｎｔｉｓｅｐｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ 为了控制药品质量，在一些制剂中加入一定量的防腐剂 ２实验方法 是常用的方法之一。《中国药典》２ＯＯ５年版对糖浆制剂中防腐 ２．１菌液的制备［２ 剂山梨酸的用量规定不得超过Ｏ．３％，山梨酸钾的杀菌抑菌性 取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培 能与山梨酸相同，许多糖浆制剂中用山梨酸钾，其用量按山梨 养物接种至营养肉汤培养基，经３７¨Ｃ培养１８～２４ｈ，备用。 酸计，为了考察在这一浓度下是否有防腐效力，笔者参考文 取白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基，经 献［１］对五味子糖浆中的防腐剂山梨酸钾进行了防腐效力测 ２５ Ｃ培养２４～４８ｈ，备用。 定，现介绍如下。 取经２５℃培养５～７ｄ的黑曲霉菌改良马丁琼脂斜面培养 物，用无菌Ｏ．９ 氯化钠溶液洗下霉菌孢子，备用。 ｌ实验材料 ２．２菌液浓度的测定 营养琼脂培养基，玫瑰红钠琼脂培养基，营养肉汤培养 分别取上述菌液适量，用无菌０．９％氯化钠溶液按１Ｏ倍系 基，改良马丁培养基，改良马丁琼脂培养基（培养基均为北京 列稀释到适宜的稀释度，取稀释液１ｍｌ加入平皿中，平行制备 三药科技有限公司生产）；铜绿假单胞菌［ＣＭｃｃ（Ｂ）１Ｏ１Ｏ４］， 两个平皿，立即倾注４５ Ｃ约１５ｍｌ相应的琼脂培养基，待凝固后 金黄色葡萄球菌［ＣＭＣＣ（Ｂ）２６ＯＯ３］，大肠埃希菌［ＣＭＣＣ（Ｂ） 细菌置３Ｏ～３５¨Ｃ培养２４～４８ｈ，真菌置２３～２８¨ｃ培养４８～７２ｈ， ４４ｌＯ２］，白色念珠菌［ＣＭＣＣ（Ｆ）９８ＯＯ１］，黑曲霉菌［ｃＭＣＣ（Ｆ） 逐日点计结果。按测定的菌数结果计算出各菌液的浓度。 ９８００３］（菌种均为中国医学微生物菌种保藏管理中心提供）； ２．３防腐效力测定方法 五味子糖浆（批号：０７Ｏ４Ｏ１、ｏ７０４ｏ２、ｏ７Ｏ５Ｏ１），生产单位为桂林 取２Ｏｍｌ五味子糖浆５份，分别加入上述已备妥的菌悬液 裕民药业。 各适量（接种菌液的体积不超过供试液体积的ｌ％，使相加后 的最终含菌浓度为ｌＯ ｃｆｕ／ｍ１）作为供试液，在２Ｏ～２５℃避光 ①作者简介：吴潇（１ ９７ｏ一），女，１９９２年毕业于桂林医学院药学系，学士学位，现任桂林食品药品检验所主管药师 ・１Ｏ６９・ 第６期 华 夏 医 学 第２１卷 密闭保存。分别经ｏ、６、２４、４８ ｈ及７、１４、２８ｄ等规定时间，按２．２ ３ 结果 项方法测定各供试液的活菌浓度。 各供试液的活菌浓度检查结果见表１。 表１接种不同时间段各菌存活浓度 “／ 表示未检出 由表１可知，供试品保存７ｄ时大肠埃希菌、铜绿假单胞菌 和金黄色葡萄球菌已未检出；保存１４ｄ时黑曲霉菌虽能检出， 数量已大大降低，２８ｄ时已未检出。 的，也说明山梨酸钾抑菌活性可忽略不计，其原因主要有两 个：一是所用培养基ｐＨ值为７，山梨酸钾抑菌活性低；二是山 梨酸钾在培养基中的浓度已非常低，不足以抑菌。 ４．３本实验结果表明，五味子糖浆如污染了以大肠埃希菌、 ４订］ｃ仑 金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌及白色念珠菌为代表的几类 微生物，存放４８ｈ后已检测不出；如污染了以黑曲霉菌为代表 的霉菌，存放２８ｄ后也检测不出。这样的检测结果虽然样品符 合规定，但并不能真实地反映生产的卫生状况，因此为了更进 一４．１ 因目前我国药典未收载防腐剂效力测定法，亦无判断标 准，笔者参照《美国药典》对实验结果作判断，即在下列情况供 试液中的防腐剂是有效的：①在ｌ４ｄ存活细菌浓度减少到不多 于最初活菌浓度的Ｏ．１ 。②在ｌ４ｄ活霉菌及酵母浓度保持或 低于最初活霉菌及酵母浓度。③在２８ｄ检查周期内的其余时 步保证样品质量，在样品为半成品及刚为成品时即进行微 生物限度检查是必不可少的。 间，每一种供试液的微生物浓度仍保持或低于指定水平。由上 述测定结果可知，五味子糖浆中的防腐剂山梨酸钾在处方中 的浓度下是有防腐效力的。 ４．２ 山梨酸钾主要在酸性溶液中形成分子态的山梨酸才能 进入细胞而起抑菌作用，ｐＨ值低于４时山梨酸抑菌活性高，当 参考文献： ［１］苏德模，马绪容．药品微生物学检验技术［Ｍ］．北京：华龄出版社， ２ＯＯ７：５４９—５５Ｏ． ［２］中国药典（二部）［ｓ］．北京：化学工业出版社，２ＯＯ５：９８（附录）． ［３］陈建文，蔡晨波．灭菌、消毒与抗菌技术［Ｍ］．北京：化学工业出版 社，２ＯＯ４：２４２—２４３． ｐＨ值高于６时抑菌活性低［ 。五味子糖浆ｐＨ值为５左右，理 论上山梨酸钾在其中亦是有效的。笔者根据《中国药典》２００５ 年版对五味子糖浆建立微生物限度检查法［２］时，直接取原液 为供试液，５种试验菌用常规法即可达９Ｏ 以上，因此在本实 验中所采用的测定供试液的活菌浓度方法（常规法）是可行 （收稿日期：２ｏＯ８—１Ｏ—Ｏ４） ［责任编辑高莉丽邓德灵］ ・１Ｏ７０・
