山东农业科学２０１５，４７（９）：６９～７２ ＤＯＩ：１０．１４０８３／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１—４９４２．２０１５．０９．０１６ 枯草芽孢杆菌Ｂｓ一１５对草甘膦的降解特性 余贤美，安淼，刘加芬，王海荣 （山东省果树研究所，山东泰安摘２７１０００） 要：为研究枯草芽孢杆菌Ｂｓ一１５对草甘膦的降解作用，以草甘膦异丙胺盐为药剂，对Ｂｓ一１５降解草 甘膦异丙胺盐的能力进行驯化，并对其培养条件进行优化，测定该菌对草甘膦异丙胺盐的降解率。结果表明， Ｂｓ一１５可耐受的草甘膦异丙胺盐浓度为４０ ０００ ｍｇ／Ｌ；草甘膦异丙胺盐浓度不高于１０ ０００ ｍｇ／Ｌ，培养基初始 ｐＨ值为８．０，接种比例为４％，于３５。Ｃ、１８０ ｒ／ｍｉｎ条件下培养６０ ｈ，可获得最佳降解，结合实际生产，将培养温 度定为３０℃；在上述优化条件下，Ｂｓ一１５对草甘膦异丙胺盐的降解率可达７０％左右。 关键词：枯草芽孢杆菌；草甘膦；降解特性 中图分类号：￥４７６．１ 文献标识号：Ａ 文章编号：１００１—４９４２（２０１５）０９—００６９－０４ Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ Ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ ｂｙ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ Ｂｓ一１ ５ Ｙｕ Ｘｉａｎｍｅｉ，Ａｎ Ｍｉａｏ，Ｌｉｕ Ｊｉａｆｅｎ，Ｗａｎｇ Ｈａｉｒｏｎｇ （Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＰｏｍｏｌｏｇｙ，Ｔａｉａｎ ２７１０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ ｂｙ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ Ｂｓ一１ ５，ｔｈｅ ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ Ｂｓ一１ ５ ｔｏ ｄｅｇｒａｄｅ ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ ｉｓｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅ ｗａｓ ａｃｃｌｉｍａｔｅｄ，ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ，ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ Ｂｓ一１ ５ ｔｏ ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ ｉｓｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｔｈａｔ Ｂｓ一１ ５ ｃｏｕｌｄ ｔｏｌｅｒａｔｅ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ ４０ ０００ ｍ＃Ｌ．Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｎｏ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ １０ ０００ ｍｇ／Ｌ ｏｆ ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ ｉｓｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅ，８．０ ｏｆ ｐＨ ｖａｌｕｅ，４％ｏｆ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｏｐ— ｔｉｍａｌ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｏｃｃｕｒｒｅｄ ｗｈｅｎ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ａｔ ３５。Ｃ ａｎｄ １８０ ｒ／ｍｉｎ ｆｏｒ ６０ ｈｏｕｒｓ．Ｔｈｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ａｄｊｕｓｔｅｄ ｔｏ ３０。Ｃ ｔｏ ｂｅ ｍｏｒｅ ｆｅａｓｉｂｌｅ ｉｎ ｐｒｏｄｕｃｔｉｖｉｔｙ．Ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ａｂｏｖｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ Ｂｓ一１５ ｔｏ ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ ｉｓｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｅ ｃｏｕｌｄ ｒｅａｃｈ ａｂｏｕｔ ７０％． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ；Ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ；Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ 草甘膦作为一种非选择性内吸传导型除草 剂，是当今世界上生产量最大、应用最广泛的农药 因此，对草甘膦的降解研究对于保护生态环 境和人体健康具有重要意义。生物降解是草甘膦 降解的最主要途径，自然界中，特别是在长期使用 草甘膦的土壤中，存在许多对草甘膦具有降解或 抗性的微生物，主要包括芽孢杆菌属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、 假单孢菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、节杆菌属（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔ— ｅｒ）、肠杆菌科（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ）、根瘤菌科 品种，在提高农业生产效率、增加农作物产量、改 善农作物品质等方面发挥着重要作用¨－２ Ｊ。草甘 膦具有广谱、高效、低毒、低残留、环境友好等优 点，但是，草甘膦的长期或不当使用及其在土壤中 的长期积累对非靶标生物和生态环境造成的破坏 作用也不容忽视 Ｊ。而且，草甘膦会被作物吸 （Ｒｈｉｚｏｂｉａｃｅａｅ）、伯克霍尔德氏菌属（Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅ． ｒ ）等 。利用高效降解草甘膦的菌株对受污 染的土壤进行生物修复，快速、安全、费用低廉，具 有广阔的应用前景ｌ１２，１３１。 收，并在组织中积累 Ｊ，当人们食人被其污染的 蔬菜、作物后，在人体内积累或富集到一定程度 时，可能会危害人体健康 。 收稿日期：２０１５—０７—０８ 基金项目：国家自然科学基金项目“嗜铁细菌对有机磷农药污染土壤的生物修复作用”（３１１００８６） 作者简介：余贤美（１９７６一），女，博士，副研究员，主要从事果树植物保护和土壤应用微生物研究。Ｅ ７０ 山东农业科学 第４７卷 枯草芽孢杆菌Ｂｓ—ｌ５为本实验室筛选保存 的一株嗜铁细菌，该菌株具有促进植物生长和防 治植物病害的功能¨ 。为探讨该菌是否具有降 解有机磷农药的功能，以及影响其降解率的各种 因素，本研究以草甘膦农药中水溶性最好的草甘 膦异丙胺盐为药剂，通过驯化，使枯草芽孢杆菌 Ｂｓ—ｌ５获得了降解草甘膦异丙胺盐的能力，并对 Ｂｓ一１５降解草甘膦异丙胺盐的培养条件进行了 优化，本研究结果可为草甘膦降解菌的开发利用 提供菌种资源和参考依据，对农业可持续发展和 生态环境的保护具有重要意义。 １材料与方法 １．１ 材料 １．１．１试剂９９．２％草甘膦异丙胺盐原药，购自 上海农药研究所；四硼酸钠（Ｎａ Ｂ Ｏ，・１ＯＨ ０）， Ｓｉｇｍａ（ＵＳＡ）产品；氯甲酸一９一芴甲酯（９一ｆｌｕ ｏｒｅｎｙｌ ｍｃｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ ｃｈｌｏｒｉｄｅ，ＦＭＯＣ—Ｃ１），默克 公司（Ｍｅｒｃｋ，Ｇｅｒｍａｎｙ）产品；乙腈和氯仿为色谱 纯，其他生化试剂均为国产分析纯。 １．１．２培养基和缓冲液ＭＳ１矿物培养基 ： ＮＨ４Ｃ１ ２．０ ｇ／Ｌ，ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．２ ｇ／Ｌ，Ｋ２ＳＯ４０．５ Ｌ，ＦｅＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ２．５ ｍｇ／Ｌ，ＣａＣ１２・６Ｈ２Ｏ １０．０ ｍｇ／Ｌ，ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ ２．０ ｍｇ／Ｌ，Ｈ３ＢＯ３ ０．０６ ｍｇ／Ｌ， ＺｎＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ２０．０ ｍｇ／Ｌ，ＭｎＳＯ４’Ｈ２Ｏ １．０ ｍｇ／Ｌ，ＮｉＣ１２・６Ｈ２Ｏ ０．０５ ｍｇ／Ｌ，Ｎａ２ＭｏＯ４・２Ｈ２Ｏ ０．３ ｍｇ／Ｌ。 硼酸盐缓冲液（ｐＨ ９．０）：称１．５２５５ ｇ四硼酸 钠，溶于适量超纯水，定容至１００ ｍＬ。 ＦＭＯＣ—Ｃ１缓冲液：准确称量ＦＭＯＣ—ＣＩ，溶 于乙腈，配制浓度为１ ｇ／Ｌ。现配现用。 １．２方法 １．２．１ Ｂｓ一１５的驯化将菌株Ｂｓ一１５接种于 含有草甘膦异丙胺盐２５ ｍｇ／Ｌ的ＭＳ１矿物培养 基中，３５℃、１５０ ｒ／ｍｉｎ振荡培养２４ ｈ，取１ ｍＬ接 人到含５０ ｍｇ／Ｌ草甘膦异丙胺盐的ＭＳ１矿物培 养基中，以同样的方法培养，根据菌株生长情况， 确定Ｂｓ—ｌ５可耐受的草甘膦异丙胺盐浓度。用 于驯化的草甘膦异丙胺盐浓度依次为：２５、５０、 １００ ２００ ４００ １ ０００ ２ ０００ ４ ０００ １０ ０００ ２０ ０００ ３０ ０００ ｍｇ／Ｌ和４０ ０００ ｍｇ／Ｌ。 １．２．２草甘膦异丙胺盐含量测定草甘膦异丙 胺盐在碱性条件下经ＦＭＯＣ—Ｃ１衍生 后，通过 紫外一可见分光光度法 进行含量测定。首先， 草甘膦异丙胺盐用０．１ ｍｏｌ／Ｌ ＫＣ１溶液配制成不 同浓度的溶液，取３ ｍＬ于１５ ｍＬ离心管中，加入 ０．５ ｍＬ硼酸盐缓冲液，混匀。然后，加入０．５ ｍＬ ＦＭＯＣ—Ｃ１缓冲液，混匀，室温静置２ ｈ，加入４ ｍＬ 氯仿（用于去除溶液中多余的ＦＭＯＣ—Ｃ１，以防止 干扰吸光值的测定），摇匀，４ ０００ ｒ／ｒａｉｎ离心６ ｍｉｎ，取水相（含衍生化产物），于紫外一可见分光 光度计中（Ｕｌｔｒｏｓｐｅｃ ２ １ ００ ｐｒｏ ＵＶ—Ｖｉｓｉｂｌｅ ｓｐｅｅｔｒｏ． ｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ，Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＵＳＡ）测定吸光 值。以０．１ ｍｏｌ／Ｌ ＫＣ１溶液３ ｍＬ为空白对照，重 复３次。 由于紫外一可见分光光度法可测定的草甘膦 异丙胺盐浓度范围为０．０８４～２１．８００ ｍｇ／Ｌｌ１７］，因 此，测定时将草甘膦异丙胺盐溶液浓度控制在 ２１．８００ ｍ＃Ｌ以下。全波段（２００～９９９ ｎｍ）扫描 结果显示，衍生后的草甘膦异丙胺盐在２６５ ｎｍ处 有最大吸收峰，与Ｗａｉｍａｎ等¨ 描述的一致，因 此，采用２６５ ｎｍ波长进行草甘膦异丙胺盐的含量 测定。并以草甘膦异丙胺盐浓度为横坐标，以吸 光值为纵坐标，绘制标准曲线。 １．２．３草甘膦异丙胺盐的降解检测将Ｂｓ一１５ 接种于１００ ｍＬ含草甘膦异丙胺盐１０ ０００ ｍｇ／Ｌ 的ＭＳ１矿物培养基中，于１５０～２００ ｒ／ｍｉｎ、３０℃条 件 下振荡培养，每１２ ｈ，取５ ｍＬ测定ＯＤ６ｏｏ和 ＯＤ 硒值，用于分析细菌的生长状况和草甘膦异丙 胺盐的降解。取出的培养液在１２ ０００ ｒ／ｍｉｎ条件 下离心５ ｍｉｎ，取上清，并经０．２２ Ｉｘｍ微孔滤膜过 滤。为确保测定的准确度和精确度，滤液用０．１ ｍｏＬ／Ｌ的ＫＣ１溶液稀释到草甘膦异丙胺盐浓度低 于２１．８００ ｍｇ／Ｌ，经处理（同１．２．２）后，于２６５ ｎｍ 处测定吸光值。以３ ｍＬ含草甘膦异丙胺盐 １０ ０００ ｍｇ／Ｌ的ＭＳ１矿物培养基为阳性对照，以 ０．１ ｍｏｌ／Ｌ ＫＣ１溶液３ ｍＬ为空白对照。根据标准 曲线，计算出相应的草甘膦异丙胺盐浓度，并按以 下公式计算降解率。 降解率（％）＝（Ｍ 一Ｍ１）／Ｍ２×１００，其中， Ｍ 为处理的草甘膦异丙胺盐含量，Ｍ 为阳性对 照的草甘膦异丙胺盐含量。 １．２．４ Ｂｓ一１５降解草甘膦异丙胺盐的培养条件 优化 以ＭＳ１矿物培养基为基础培养基，以 １．２．１中驯化时的培养条件３５ｑＣ、１５０ ｒ／ｎｆｉｎ、 ｐＨ ７．０、接种比例为２％为基础条件，某一条件设 多个处理，而其他条件固定，逐一对培养条件进行 筛选，研究草甘膦异丙胺盐浓度（２ ５００、５ ０００、 １０ ０００、２０ ０００ ｍｇ／Ｌ和４０ ０００ ｍｇ／Ｌ）、培养温度 （２０、２５、３０、３５ｃＣＩ和４０ｏＣ）、振荡速率（９０、１２０、 第９期 余贤美，等：枯草芽孢杆菌Ｂｓ一１５对草甘膦的降解特性 ７１ １５０、１８０ ｒ／ｍｉｎ和２１０ ｒ／ｒａｉｎ）、培养基ｐＨ值（５．０、 ６．０、７．０、８．０和９．０）、接种比例（２％、４％、６％、 ８％和１０％，以新接种培养过夜的菌液为母液，其 ０Ｄ㈣＝０．８～１．０）等培养条件对草甘膦异丙胺盐 降解率的影响，并测定优化培养条件下的降解率。 ２结果与分析 ２．１ Ｂｓ一１５的驯化结果 草甘膦异丙胺盐浓度（ｆｆＩｇ・Ｌ ） 经梯度驯化，随着培养基中草甘膦异丙胺盐 浓度的提高，菌株Ｂｓ一１５的生长情况逐步减弱，到 草甘膦异丙胺盐浓度高达４０ ０００ ｍｇ／Ｌ时，Ｂｓ一 １５仍能生长，说明经驯化，Ｂｓ一１５能够耐受浓度 为４０ ０００ ｍｇ／Ｌ的草甘膦异丙胺盐。 ７０ ６ｏ ５Ｏ ４０褂 ３Ｏ ２Ｏ数 ｌ０ ０ ２．２草甘膦异丙胺盐含量标准曲线 配制不同浓度的草甘膦异丙胺盐溶液，经衍 生后测定吸光值，以草甘膦异丙胺盐浓度为横坐 标，以吸光值为纵坐标，得出标准曲线：Ｙ＝ ０．１０８４ｘ＋０．０４６，Ｒ ＝０．９９８７（图１）。 时间（ｈ） 图２ Ｂｓ一１５的生长曲线和草甘膦异丙胺盐降解曲线 ２．３草甘膦异丙胺盐降解曲线 将Ｂｓ一１５接种于含草甘膦异丙胺盐１０ ０００ ｍｇ／Ｌ的ＭＳ１矿物培养基中进行培养，每１２ ｈ取 样测定草甘膦异丙胺盐含量，结果显示，４８ ｈ以 内，Ｂｓ一１５生长迅速下降，而草甘膦异丙胺盐的 降解迅速上升，之后Ｂｓ一１５的生长和草甘膦异丙 胺盐的降解渐趋稳定，６０ ｈ与７２ ｈ的值差异不显 著（图２），因此，确定最佳降解时间为６０ ｈ。 ７０ ６ｏ ５ｏ ＾ Ｖ ２．４培养条件对草甘膦异丙胺盐降解率的影响 研究了温度、振荡速率、培养基初始ｐＨ值、 接种比例、草甘膦异丙胺盐浓度等培养条件对 Ｂｓ一１５降解草甘膦异丙胺盐效率的影响，结果 （图３）显示，当草甘膦异丙胺盐含量为１０ ０００ ｍｇ／Ｌ，培养基初始ｐＨ值为８．０，接种比例为４％， 于３５ＣＣ、１８０ ｒ／ｍｉｎ条件下培养６０ ｈ，可获得最佳 降解效果，优化培养条件下降解率为６６．３５％，说 明培养条件对降解率有较大的影响。 ７０ ６ｏ 祷 料５ｏ 黠４ｏ 遨３０ ２０ 琏 逝 琏４ｏ 逝３０ ２０ 振荡速率（ｒ・ｒａｉｎ－＇） ７０ ６ｏ ５ｏ 萋４０ ３Ｏ ２０ 图３ 培养条件对Ｂｓ一１５降解草甘膦异丙胺盐的影响 本研究中，Ｂｓ一１５对草甘膦异丙胺盐降解 的最佳培养温度为３５℃，与细菌的最佳生长温度 范围相一致，但是在实际应用过程中不现实，因 此，后续试验中，将培养温度统一为３０％，在此优 ３０￣Ｃ的培养温度对于Ｂｓ一１５降解草甘膦效率的 影响较小，可以忽略不计。 ３结论与讨论 近年来，利用微生物的降解功能处理环境中的 化条件下，降解率为６６．１５％，略有下降，可见 ７２ 山东农业科学 第４７卷 草甘膦污染及其残留越来越受到重视，利用高效降 解草甘膦的微生物菌株来降解环境中残留的草甘 膦，具有快速、安全、费用低廉等优点，已成为了国内 外的研究热点，具有广阔的应用前景 ＇”Ｊ。 通过驯化筛选，可以增强微生物某一特定功 能。汤鸣强等 采用培养基中添加不同浓度梯 度的草甘膦对从耕作土壤中分离到的草甘膦降解 菌进行驯化培养，获得了一株对草甘膦具有高耐 受性、高降解能力（降解率为８５．３８％）的菌株胶 红酵母Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ ｍｕｃｉｌａｒｉｎｏｓａ ＺＭ一１。Ｍｏｎｅｋｅ 等 的研究表明土壤中的某些微生物，如假单孢 杆菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、固氮菌（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ）、醋酸 杆菌（Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ）和产碱杆菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ），可利 用草甘膦异丙胺盐为唯一碳源在矿物培养基中生 长。本研究中，随着草甘膦异丙胺盐浓度的增加， 菌株Ｂｓ—ｌ５的长势渐弱，但该菌株在草甘膦异丙 胺盐浓度高达４０ ０００ ｍ＃Ｌ时仍能生长，说明 Ｂｓ一１５能以草甘膦异丙胺盐为碳源，且可耐受高 浓度的草甘膦异丙胺盐。 用于草甘膦含量检测的方法有很多，Ｗａｉｍａｎ 等Ⅲ 采用紫外分光光度法检测草甘膦含量，该方 法操作简便、快速，对设备要求低，只需要一台紫 外分光光度计即可。该方法由衍生和吸光值测定 两个步骤组成，其精确度和灵敏度可能低于色谱 法或毛细管电泳等方法，但足够用于草甘膦含量 的测定。因此，本研究采用Ｗａｉｍａｎ等 的方法 对水溶性的草甘膦异丙胺盐含量进行测定，得到 了稳定的结果，而且具有良好的重复性。 笔者研究了温度、振荡速率、培养基初始ｐＨ 值、接种比例、草甘膦异丙胺盐浓度等培养条件对 Ｂｓ—ｌ５降解草甘膦异丙胺盐效率的影响，优化了 降解培养条件，获得了较高的降解效率，在优化条 件下，Ｂｓ一１５对草甘膦异丙胺盐的降解率可达到 ７０％左右。本研究结果说明，Ｂｓ一１５对草甘膦具 有较高的耐受性和降解能力，可作为潜在菌株，用 于草甘膦等有机磷农药残留的降解，为解决有机磷 农药污染及残留问题提供菌株资源和参考数据。 参考文献： ［１］ Ｊｏｈａｌ Ｇ Ｓ，Ｈｕｂｅｒ Ｄ Ｍ．Ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｄｉｓｅａｓｅｓ ｏｆ ｐｌａｎｔｓ ［Ｊ］．Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｏｎｏｍｙ，２００９，３１：１４４—１５２． ［２］Ｍｂａｎ￣ｏ Ｆ Ｕ，Ｃｏｕｐｅ Ｓ Ｊ，Ｃｈａｒｌｅｓｗｏｒｔｈ Ｓ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ— ｂａｓｅｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ｇｌｙｐｈｏｓａｔｅ——ＣＯｉｌ・ －ｔａｉｎｉｎｇ ｈｅｒｂｉｃｉｄｅ Ｏｉｌ ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ ａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｉｎ ａ ｍｏｄｅｌ ｐｅｒｖｉｏｕｓ ｐａｖｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．Ｃｈｅｍｏｓｐｈｅｒｅ，２０１３，９０： ７３７—７４６． ［３］ＫｏｇｅｒＣＨ，ＳｈａｎｅｒＤ Ｌ，Ｋｒｕｔｚ Ｌ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｒｉｃｅ（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ） ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ｄｒｉｔｆ ｒａｔｅｓ ｏｆ 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