山东医药２０１２年第５２卷第３５期 精浆锌含量与精液质量及体外受精 结局的相关性 江莉，李慕军，牛冉冉，翟丹梅，袁华 （广西医科大学第一附属医院，南宁５３００２１） 摘要：目的探讨精浆锌含量对精液质量及体外受精（ＩＶＦ）结局的影响。方法采用５一Ｂｒ．ＰＡＰＳ显色法检测 ８ｌ例不育男性患者精浆锌含量，Ｓｐｅａｒｍａｎ相关分析法分析精浆锌含量与精液常规参数、成熟精子率及ＩＶＦ结局的 关系。结果 Ｓｐｅａｒｍａｎ相关分析显示精浆锌含量与精子密度、精子活率、ＩＶＦ受精数呈显著正相关（ｒ＝０．４９、 ０．３０５、０．２８９，Ｐ均＜０．０５，与不成熟精子率呈负相关（ｒ＝一０．２７８，Ｐ＜０．０５），与精子正常形态率及ＩＶＦ卵裂率、优 胚率无相关性（Ｐ均＞０．０５）。结论适量的精浆锌含量能够促进精子核成熟，精浆锌含量降低可致精子密度和活 率下降，使ＩＶＦ受精数降低；但是对精子的正常形态率，ＩＶＦ卵裂率和优质胚胎率无显著影响。 关键词：精浆，锌；精液质量；体外受精 中图分类号：Ｒ６９８．２ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－２６６Ｘ（２０１２）３５４３０２２－０３ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｅｍｉｎａｌ ｐｌａｓｍａ Ｚｉｎｃ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｅｍｅｎ ｑｕａｌｉｔｙ， ｏｕｔｃｏｍｅｓ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ＪＩＡＮＧ Ｌｉ，ＬＩ Ｍｕ￣ｕｎ，ＮＩＵ Ｒａｎ－ｒａｎ，ＺＨＡＩ Ｄａｎ—ｍｅｉ，ＹＵＡＮ Ｈｕａ （Ｔｈｅ Ｆｉｍｔ Ａｆｉｆｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ ５３００２１，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｅｍｉｎａｌ ｐｌａｓｍａ Ｚｉｎｃ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｐｅｒｍ ｑｕａｌｉｔｙ， ｏｕｔｃｏｍｅｓ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ Ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｔｈｅ ｓｅｍｉｎａｌ ｐｌａｓｍａ Ｚｉｎｃ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ８１ ｉｎｆｅｒｔｉｌｅ ｍｅｎ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ５－Ｂｒ—ＰＡＰＳ ｓｔａｉｎｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ．Ｓｐｅａｒｍａｎ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｅｍｉｎａｌ ｐｌａｓｍａ Ｚｉｎｃ．ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｓｅｍｅｎ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ａｎｄ ＩＶＦ ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｒａｔｅｓ，ｃｌｅａｖａｇｅ ｒａｔｅ，ａｎｄ ｇｏｏｄ ｑｕａｌｉｔｙ ｅｍｂ￣ｏ ｒａｔｅ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｅｍｉｎａｌ ｐｌａｓｍａ Ｚｉｎｃ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｓｐｅｒｍ ｄｅｎｓｉｔｙ，ｍｏｔｉｌｉｔｙ ａｎｄ ＩＶＦ ｆｅｔｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｒａｔｅ（ｒ＝０．４９，０． ３０５，０．２８９；ａｌｌ Ｐ＜０．０５）；ｂｕｔ ｗａｓ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｓｐｅｒｍ ｒａｔｅ（ｒ＝一０．２７８，Ｐ＜０．０５）．Ｈｏｗｅｖｅｒ， ｎｏ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｗａｓ ｆｏｕｎｄ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｅｍｉｎａｌ ｐｌａｓｍａ Ｚｉｎｃ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｅａｖａｇｅ ｒａｔｅ，ｇｏｏｄ ｑｕａｌｉｔｙ ｅｍｂ￣ｏ ｒａｔｅ（ａｌｌ Ｐ＞０． ０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｓｅｍｉｎａｌ ｐｌａｓｍａ ｚｉｎｃ ｌｅｖｅｌ Ｃａｌｌ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｐｅｒｍ ｎｕｃｌｅａｒ．Ｓｅｍｉｎａｌ ｐｌａｓｍａ ｚｉｎｃ ｃｏｎｔｅｎｔ ｃａｎ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｓｐｅｒｍ ｄｅｎｓｉｔｙ ａｎｄ ｍｏｔｉｌｉｔｙ，ａｎｄ ａｌｓｏ ｃａｎ ｄｅｃｒｅａｓｅ ＩＶＦ ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｒａｔｅ；ｂｕｔ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｉｍｐａｃｔ ｃａｎ ｂｅ ｓｅｅｎ ｔｏ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｓｐｅｒｍ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ，ＩＶＦ ｅｍｂ￣ｏ ｃｌｅａｖａｇｅ ｒａｔｅ ａｎｄ ｑｕａｌｉｔｙ ｒａｔｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｓｅｍｉｎａｌ ｐｌｓｍａ，Ｚｉａｎｃ；ｓｅｍｅｎ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ；ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ 精浆中的锌由前列腺分泌，其作为精浆中的一 种微量元素，对精子的发生、成熟和获能具有一定的 作用。目前，国内外对精浆锌与精液质量关系的研 究结果尚不一致。２０１１年７～１１月，我们采用５－Ｂ卜 ＰＡＰＳ显色法对８１例不育男性患者进行精浆锌含量 １．１ 临床资料选取因输卵管因素致不孕在我院 接受ＩＶＦ—ＥＴ诊疗的８１对夫妇，男（３１．７３－４－３．５２） 岁，（２９．３１±３．３１）岁；原发性不育３０例，继发性不 育５１例。纳入标准：所有夫妇均为初次接受常规 ＩＶＦ助孕，女方年龄≤３５岁，除单纯输卵管梗阻外， 检测，并分析精浆锌含量与精液常规参数、不成熟精 子率及体外受精（ＩＶＦ）结局的相关性。现报告如 下。 所有入选女性经体检、妇科超声及内分泌、血生化等 检查未发现其他可能影响生育的疾病。人选女性取 卵子均不少于５枚，男性均能够提供新鲜精液。术 前精液常规检查按照ＷＨＯ（人类精液检查与处理 １资料与方法 基金项目：广西卫生厅重点科研课题（桂卫重２００８４６）；广西教育厅高等学校科研项目（２００１０３ＹＢ０２３）。 作者简介：江莉（１９７２一），女，硕士，副教授，研究方向为生殖医学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｊｉａｎｇｌｉｇｘ＠ｙａｈｏｏ．ＣＯＢ・ｃａ 通讯作者：李慕军（１９６０一），女，博士，教授，研究方向为生殖医学，承担课题８项，近５年发表论文３０余篇。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｍｊ１６９９＠ｖｉｐ・１６３・ＣＯｍ ２２ 山东医药２０１２年第５２卷第３５期 实验室手册》（２０１１年，第五版）标准 ，排除严重 少弱精症。 １．２精液检查男性禁欲（５．４９±１．３７）ｄ，留取 ０．５～１ ｍＬ精液，３ ０００ ｇ离心１０ ｍｉｎ，留取精浆置于 一２０ ｃＩ＝冰箱储存。参照文献 处理方法行精液检 查。按照ＷＨＯ｛人类精液检查与处理实验室手册》 标准 ］，测定以下参数判断精液质量：①精浆锌含 量：采用５．Ｂｒ—ＰＡＰＳ显色法，严格按照试剂盒说明书 操作，在配有５６０ ｎｍ波长滤光片的酶标比色仪上进 行检测。通过比较吸光度值，拟合标准曲线，从标准 曲线上读取标本中锌的浓度。精浆锌总量（ ｍｏ１） ＝锌浓度×精液总体积（ｍＬ）。②精液常规参数：包 括精液量、精子密度，精子活率、精子正常形态率 （依照ＷＨＯ实验室标准，采用Ｄｉｆ－Ｑｕｉｋ快速染色 法染色，在光学显微镜油镜（×１ ０００）下，每片读取 ２００个精子，用Ｋｒｔｉｇｅｒ Ｓ严格标准法进行判别，计数 正常形态精子所占比率。③不成熟精子率：采用经 密度梯度离心法检测精子核成熟度。高倍显微镜下 观察，至少计数２００个精子。核蛋白不成熟的精子 染紫蓝色或紫色，核蛋白成熟的精子染红色。计数 头部染紫蓝色和紫色的精子（不成熟精子）。不成 熟精子率＝［（精子头部染紫蓝色精子＋染紫色精 子）／２００］×１００％。 １．３ ＩＶＦ及结局判断女性黄体中期应用促性腺 激素释放激素激动剂（ＧｎＲＨ．ａ）达菲林降调节，达降 调节标准后常规应用促性腺激素启动剂量，用Ｇｎ ４ ～５ ｄ后根据阴道超声监测卵泡数目、大小，行血清 激素测定，根据检测结果调整Ｇｎ用量。超声监测 到３个以上优势卵泡直径≥１８ ｍｍ时当晚即肌注绒 促性素１０ ０００ Ｕ，３４～３６ ｈ于阴道超声引导下行穿 刺取卵术。参照文献 分析胚胎质量，ＩＶＦ受精率 ＝受精胚胎数／获卵数×１００％，卵裂率＝卵裂数／受 精数×１００％，优胚率＝优胚数／卵裂数×１００％。 １．４相关性分析采用ＳＰＳＳ１３．０统计软件，计量 资料以 ±５表示，采用Ｓｐｅａｒｍａｎ相关性分析法分 析精浆锌含量与精液密度、活率、正常形态率、成熟 精子率和ＩＶＦ结局的相关性。检验水准 ＝０．０５。 ２结果 ２．１精液指标精浆锌含量（２．１３±１．Ｏ１） ｍｏｌ。 精液量（４．１５±１．４８）ｍＬ，精液密度（９２．５２±５５．１８） １０。／ｍＬ，精子活率（６２．６４±１４．８８）％，正常形态率 （７．３９±３．４８）％；不成熟精子率（３５．１６± １Ｏ．８７）％。 ２．２ ＩＶＦ结局ＩＶＦ受精数（９．６８±４．４０）枚，卵裂 数（９．４０±４．３５）枚，优胚数（５．８３±３．７３）枚。 ２．３相关性分析Ｓｐｅａｒｍａｎ相关分析示精浆锌含 量与精液密度、精子活率、ＩＶＦ受精数呈显著正相关 （ｒ＝０．４９、０．３０５、０．２８９，Ｐ均＜０．０５），与不成熟精 子率呈负相关（ｒ＝一０．２７８，Ｐ＜０．０５），与精子正常 形态率及ＩＶＦ卵裂率、优胚率无相关性（Ｐ均＞ ０．０５）。 ３讨论 近年来随着男性不育患者逐年增多，精浆锌含 量与男性不育的关系逐渐成为研究的热点之一。精 液中的锌主要来源于前列腺，在精子发生、成熟、获 能、顶体反应和受精过程中起重要作用。 本文结果显示，精浆锌含量与精子密度、活率呈 正相关，说明适量增加精浆锌含量可以提高精子的 密度和活率。其可能原因为：①精浆中的锌通过干 扰垂体分泌促性腺激素降低性腺功能从而使精子生 成减少 Ｊ。②锌参与生殖系统多种酶的合成，这些 酶可延缓精子细胞膜的脂质过氧化，维持细胞膜的 通透性，使精子具有良好的活力，故缺锌可降低相关 酶的活性，进而影响精子发生过程 。但罗胜萍 等 发现，精液中锌含量过高对精子也有明显的毒 性作用，过量的锌及其氧化物可抑制精子的酵解及 氧化过程，致使精子活力下降和死精。因此，在男性 进行补锌治疗的同时应监测精浆锌含量变化。本研 究结果显示，精浆锌与精子正常形态率无相关性，说 明精浆锌含量并不影响精子的正常形态，这与冯播 等－ｏ 研究结果相同。 精子核蛋白的主要成分为鱼精蛋白，鱼精蛋白 富含精氨酸和半胱氨酸，一般不含赖氨酸，人类精子 发生和成熟过程中，经历核蛋白组型转换过程，即富 含精氨酸和半胱氨酸的鱼精蛋白取代富含赖氨酸的 组蛋白，苯胺蓝可与富含赖氨酸的组蛋白结合而使 不成熟的精子染成蓝色，因此，用苯胺蓝染色可检测 精子的核成熟度。本研究发现，精浆锌含量与不成 熟精子率呈负相关，说明精浆锌能促进精子核的成 熟。可能是因为精子在附睾中成熟时，鱼精蛋白的 巯基问形成二硫键，使精子核染色质趋于稳定，同时 在前列腺液锌离子的作用下，余下的游离巯基间形 成共价键，促进使精子核成熟 。 目前，国内外对精浆锌与ＩＶＦ结局的关系报道 相对较少。本文结果显示，精浆锌含量与ＩＶＦ受精 数呈正相关，说明适量增加精浆中的锌含量会提高 受精数，可能是因为一定浓度的锌使精液密度和活 率相应的增加，同时在排精过程中，精子吸收精浆中 的锌与细胞核染色质的巯基结合，从而有利于受精。 但本研究还发现，精浆锌含量与卵裂率、优胚率并无 ２３ 山东医药２０１２年第５２卷第３５期 相关性，说明精浆锌对受精后的胚胎质量并无影响。 综上所述，精浆锌含量与男性不育密切相关，适 量的精浆锌能够促进精子核成熟，其含量降低将影 响精子的发生、发育和成熟，引起精液密度和活率下 ［３］崔艳国，张立新，董丽萍，等．男性低生育人群精浆锌、酸性磷酸 酶及血清性激素水平及意义［Ｊ］．山东医药，２０１０，５０（２５）：８５． ８６． ［４］Ｅｌｚａｎａｔｙ Ｓ．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｇｅ ａｎｄ ｅｐｉｄｉｄｙｍａｌ ａｎｄ ａｃｃｅｓｓｏｒｙ ｓｅｘ ｇｌａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｔｏ ｓｐｅｒｍ ｍｏｔｉｌｉｔｙ［Ｊ］．Ａｒｃｈ Ａｎｄｒｏｌ，２００７，５３（３）：１４９—１５６． 降，从而使受精数降低。精浆锌含量检测对促进男 性不育的诊断及治疗有一定指导作用。 参考文献： ［１］谷翊群，陈振文，卢文红，等．世界卫生组织人类精液检查与处理 实验室手册［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２０１１：１９１—１９４． ［５］罗胜萍，吴蓉，刘自刚．男性不育患者精浆锌含量的变化分析 ［Ｊ］．中国实验诊断学，２００９，１３（６）：８２８—８２９． ［６］冯播，左阳花．不育男性精浆果糖及精浆锌含量的研究［Ｊ］．中 国优生与遗传杂志，２０１０，１８（７）：１１７—１１８． ［２］李娜，江莉．精子ＤＮＡ损伤对体外受精一胚胎移植结局的影响 ［Ｊ］．广西医学．２０１１。３３（３）：２５７－２６０． ［７］郭应禄．男性不育症［Ｍ］．北京：人民军医出版社，２００３：９２． （收稿日期：２０１２－０４－２２） ・告读者・ 医学论文中“隔”与“膈”、“瘘”与“漏”的正确使用 “隔”与“膈” 隔《现代汉语词典》释义１对其解释为“遮断；阻隔。如隔河相望、隔着一重山等”。膈《现代汉语词 典》的解释为“人或哺乳动物胸腔和腹腔之间的膜状肌肉。收缩时胸腔扩大，松弛时胸腔缩小。旧称横膈 膜”。 这２个字在医学论文中的误用源于“纵隔”与“横膈”的使用。纵隔是两侧纵隔胸膜之间所有器官的总 称，它们借疏松的结缔组织互相联结，以利于各器官的活动。纵隔的前界是胸骨，后界为脊柱胸段，两侧壁为 纵隔胸膜，上经胸廓上口与颈部相通，底为膈肌。纵隔不是器官，而是一个解剖的区域；因此，纵隔应当用隔 离的“隔”。横膈是将腹腔和胸腔分隔开的膜状肌肉，因此，“横膈”不应写作“横隔”。 “瘘”与“漏” 漏《现代汉语词典》释义２对其解释为“物体有孔或缝，东西能滴下、透出或掉出。如漏勺等”。瘘《辞 海》释义２对其的解释为“空腔脏器与体表或空腔脏器之间不正常的通道，常由外伤、炎症、手术并发症等造 成，形成后不易自愈，常需手术治疗”。 医学论文中，瘘一般与瘘管、瘘道连用，指人体内发生脓肿时生成的管道，管道的开口或在皮肤表面或与 其他内脏相通，病灶内的分泌物可以由瘘管流出来。漏指物体有孔或者缝隙，东西能滴下或透出，并不存在 管道。临床上常见“胆瘘”与“胆漏”。胆瘘是指胆汁经异常通道向异常出口排出的现象，可能起源于肝内外 胆管或胆囊，通向某处或多处器官、孔道、体腔或体表，其间存在着１个或多个病理性通道。而胆漏多在起病 后短期内出现，常急骤发生，不具备瘘管，只有胆汁漏出，常见于创伤性或手术后的数日之内。胆管或胆囊因 急性炎症或其他病变所致穿孔或破裂发生胆汁漏出，初期未形成瘘管前亦属胆漏。胆外漏持续日久即形成 瘘管成为胆外瘘。两者根本区别在于有无瘘管。例如，“对术后出现的胃排空障碍、吻合口漏等并发症的治 疗，ＥＮ组有明显优势”。句中“漏”应为“瘘”。 （摘编自《编辑学报》２０１ｌ，２３（１）：３６）
